利用液氮罐进行试管婴儿胚胎解冻操作步骤。
要想移植冻胚必须在胚胎移植前将冷冻胚胎解冻。胡淑敏带您一同了解一下胚胎解冻的操作步骤。
1、确认患者身份找出相应麦管,从液氮罐中取出麦管,室温中 40 秒(温度上升 300 ℃ /min),并进行记录。将解冻液器皿上标上记号TS1,TS2,TS3及Cryo-PBS。
2、拿出麦管室温下解冻30秒。用纸擦去麦管外面的冰,室温解冻时必须仔细检查麦管内是否有气泡、裂缝或者液氮渗漏。
3、将麦管放进30℃水中浴30秒。拿出小心擦干。消毒剪去一端,接上1ml注射器。然后剪去另一端,留意不要晃动以免造成气泡。
4、小心地将胚胎吹入TS1中。观察胚胎是否从麦管中被吹了出来,假如没被完全吹出来,应当吸取一点液体再次。胚胎可能会偶然黏附在麦管壁上。
5、在TS1中孵育5分钟。
6、小心地将胚胎移入TS2保持5分钟。
7、移入TS3中5-10分钟。渗透压变化使质膜变脆弱。
8、将胚胎放进室温Cryo-PBS,接着放入37℃器皿中保持10分钟。不要放入二氧化碳培养箱,由于Cryo-PBS对5%CO2的缓冲能力不足。
9、然后可以将胚胎放入IVFTM、G1.2TM或者G2.2TM中。检测胚胎存活率并评价胚胎形态。这时的胚胎可以立即进行移植,也可以在培养一段时间后移植。原核卵子应当在IVFTM或者G1.2TM中培养过夜,假如分裂正常才能进行移植。
10、解冻操纵过程对胚胎冷冻成功与否也极为关键。确保在适宜的时间将胚胎移植进入受体子宫。冷冻胚胎既可以在自然周期,在可以在人工周期移植。
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