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液氮速冻处理对样本保存的影响

1.液氮速冻处理对样本保存的影响 液氮速冻处理的10头亚洲小车蝗样本在12h内均无存活迹象。说明通过液氮速冻处理能够使亚洲小车蝗活体样本迅速死亡,从而消除因逆境胁迫造成的样本本身生理生化变化,避免了这些变化对蝗虫样本基因组DNA提取产生可能的不利影响。

2.不同保存方法对基因组 DNA提取影响亚洲小车蝗经基因组DNA提取后,用1%的琼脂糖凝胶电泳检测结果见图1~3。由图可见,液氮速冻后保存和无水乙醇保存的样本提取的基因组DNA电泳条带清晰、无拖尾且亮度高,说明得到的DNA浓度较大;直接冷冻保存的样本提取的DNA电泳检测结果显示条带整齐、无拖尾,但是亮度较低,说明得到的DNA浓度较小;蝗虫干标本提取的基因组DNA电泳检测显示条带不清楚,并有明显拖尾现象,有的甚至看不到条带,说明干制标本保存会导致蝗虫基因组DNA发生严重降解,会对下一步基因扩增、分子标记等分子生物学试验的进行造成不利的影响。

3.冷冻胁迫对基因组DNA提取影响对比液氮速冻后保存和直接冷冻保存两种样本保存方法对蝗虫基因组DNA提取结果可以看出,液氮速冻后保存的样本提取的基因组DNA明显比直接冷冻保存的样本基因组DNA的电泳条带亮度高,说明液氮速冻后保存得到的DNA的浓度较大。由此得出,样本在受到冷冻胁迫死亡的过程中会发生基因组DNA降解现象,使提取得到的DNA 的浓度较小。所以,液氮速冻后保存更适合昆虫基因组学的研究。


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