复苏冷冻细胞注意事项-北京班德液氮罐

复苏冷冻细胞注意事项

1、冷冻越慢越好，复苏越快越好

细胞冷冻越慢越好，细胞冷冻前，要有充足的时间;复苏是相反的，速度越快越好。从液氮罐里取出来之后，迅速放在37℃水浴中，然后使劲摇，让它尽快融化。

2、细胞冻存和复苏注意事项

和液氮接触时，要戴保护眼镜和手套。因为复苏过程中摇晃，小瓶有可能会爆炸;还有，冻存液中的DMSO是有毒致癌的。所以接触的时候一定要带好手套。

3、冻存细胞数量要足够

无论再怎么小心，细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一批的。所以，一开始冻存细胞的数量要足够。

4、做好标记

把培养瓶放入提手，末端应该扎有小牌，注明主人的名字，细胞名称和冻存日期。还要在每个冻存管上写上细胞名称，代数和冻存日期。实验室的液氮罐都是公用的。每个人应该有属于自己的提手，会为找自己液氮罐省去好多时间。

5、细心照料

复苏的细胞非常脆弱，需要我们的细心呵护。一切和细胞接触的动作都要轻柔。

6、DMSO的问题

前面提到了DMSO是一种有毒致癌物质。那么，解冻之后，应不应该去除冻存液中的DMSO呢?

是不需要去除的。除了极少数特别注明的对DMSO敏感的细胞外，99%的细胞都不需要去除DMSO。解冻后的频繁换液会慢慢去除掉DMSO的。

7、解冻前后细胞所用物质要相同

因为每一种细胞都有自己特定的，并且已经熟悉了的生长环境。突然使用不一样的培养液和血清，会造成细胞生长不良，甚至死亡。

细胞培养是个费力的事情，要经常关注。要时刻注意培养箱里面的细胞是不是该换液了。而掌握了有效的冻存和复苏的技术，就可以解决这个问题。

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