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菌种如何保藏?

如今生物保鲜已成为国内外科研工作者研究的重点,利用微生物拮抗菌进行保鲜。菌种保藏方法有传代保藏法、液体石蜡覆盖保藏、冷冻干燥保藏、液氮超低温保藏、蒸馏水保藏等菌种保藏方法,他们各有各的优点,具体使用哪个方法,要针对不同的拮抗菌的特点及保藏目的需要,从而选择最好的保藏方法。

举例说明:

液氮超低温保藏法:是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内,将该安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。由于菌丝体处于-196℃,其代谢降低到完全停止的状态。甘油、血清蛋白、二甲基亚砜、聚乙烯氮戊环、糊精、吐温80等可用做液氮低温保藏法的保护剂,其中甘油在进入和游出细胞时速度非常缓慢,造成强烈的脱水,从而保护细胞,是目前最常用的保护剂。不同微生物要选择不同的保护剂,再通过实验加以确定保护剂的浓度,原则上是控制在不足以造成微生物致死的浓度,一般甘油为10%-20%、二甲基亚砜为5%-10%、聚乙烯氮戊环为0.4mmol/L。

冷冻干燥保藏法:为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用。这种方法适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十余年。因为冷冻干燥法使菌种处于一个无氧的真空环境中,微生物不能进行正常的新陈代谢,只能处于休眠状态。当环境变为适合生长的适合,才会继续增殖生长。所以保藏期就比较长。目前像春雷霉素、头孢霉素、卡那霉素等抗生素菌种不易产生孢子的丝状真菌,都是采用冷冻干燥法保存的。另外我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。

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