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气相液氮运输罐短期储存胚胎的可行性研究

 

气相 液氮运输罐(简称:液氮罐)短期储存胚胎的可行性研究

【摘要】目的探讨用气相液氮运输罐运输小鼠胚胎和短时间保存小鼠胚胎的可行性。方法实验使用4个小鼠品系(c57Bu6、B6D2、DBA/2、B10A),通过体外授精的方法得到2.细胞胚胎,用玻璃化冷冻法冷冻胚胎并储存于液相液氮罐,然后转移至气相液氮运输罐内放置14 d再转入液相液氮罐,最后进行复苏移植。

结果4个品系的冷冻胚胎的复苏率分别为69.7%、77.27%、77.59%、72.64%,对照组的相应复苏率为97%、84.38%、75%、71.43%,差异均不明显(p<0.05).4个品系胚胎移植后,除B10A这个品系的出生率差异显著外(尸0.05)。结论在气相液氮运输罐短时间内储存胚胎或通过气相液氮运输罐进行胚胎运输是可行的。
[关键词】小鼠胚胎;气相液氮运输罐;低温保存

哺乳动物的胚胎超低温保存最早在小鼠获得成功,1972年英国学者Whittingham首先成功地冷冻保存了小鼠胚胎,发明了胚胎的慢速冷冻保存方、法【1】。1985年RaU等【z】成功保存小鼠8细胞胚胎。此后,研究人员主要从事低毒性的玻璃化溶液、简化冷冻程序和除去毒性抗冻剂等方面对玻璃化冷冻法加以改进【}s1。

传统的长期活体保种,不但需要大量空间、人力、物力,还可能发生遗传漂变和遗传污染【61。许多实验室都通过冷冻保存小鼠胚胎的方法建立冷冻胚胎库,因此引进新的小鼠品系越来越多地通过引进小鼠胚胎的形式进行。

但传统的液相液氮罐在运输时有不少缺点,罐体体积大、分量重,溢出液氮容易冻伤人等。而新型的气相液氮运输罐是靠罐壁内层的液氮层吸附大量液氮,并向外排出液氮蒸汽来使罐内温度达到一188℃至一194℃保存胚胎。它有着体积小分量轻的优点,方便运输,还可以降低胚胎之间交义污染。

本文通过小鼠冷冻2一细胞胚胎在气相液氮运输罐保存14 d后,进行复苏和移植,并和保存在传统液相液氮罐胚胎的复苏率和出生率相比较,来探讨用气相液氮运输罐运输或短期保存小鼠胚胎的可行性。

 

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