用原来的传代法制备的攻击菌不但菌种的消费大，而且因传代培养基的不同而各批间的效价检测结果会有差异。而液氮保存攻击菌解决了以上的问题。液氮罐价格

试验表明，将攻击菌复苏、传代（3~9代）、分装并保存在液氮中，攻击菌仍然保持原有的生物学特性，符合《中华人民共和国药典》〔2〕中攻击菌的LD50为100~1000 /MLD的要求，可用于无细胞百日咳效力检定。且有较好的稳定性，该法制备的攻击菌用于检定可减少人力、物力并节省时间，降低生产成本，提高工作效率，并能使每批的检定结果不因攻击菌的变化而受影响。因同批制备的攻击菌支间差异不显著，从而更能准确地反映制品的真实效价结果。

在攻击菌制备过程中，通过多次反复试验取得了一些经验，现表述如下:

①在制备过程中攻击菌的浓度测定非常重要，制备过程严格控制不受污染，而且必须纯菌检查合格;

②要注意在放入液氮前，一定要先缓冻，慢速冷却会有充分的时间使细胞内的水分向外渗出达到平衡，快速冷却没有充分的时间使细胞内的水分向外渗出、脱水，加速细胞内冰晶增大，使细胞处于损伤状态或潜在的损伤状态; 液氮罐价格

③快速加温融化不会在解冻过程中其冰晶损伤细胞〔3〕，因此解冻时一般在3分钟左右为宜。在生产实践中需不断积累经验、掌握操作技能，为提高制品质量，在攻击菌的应用上尚有待进一步改进。

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