液氮罐对胚胎的冷冻保存技术
利用液氮罐来保存胚胎,是一种最常规的胚胎保存方法。冷冻保存技术是指在低温条件下利用低温保护剂保存胚胎的一门技术。这一技术是20世纪后半叶随着人工授精技术广泛应用而产生的,目前已成为了现代生命科学研究必备的手段之一。动物胚胎的冷冻保存原理就是因为低温降低了胚胎内的变质反应速度,温度越低,胚胎保存时间就越长。
目前已研究出多种胚胎冷冻保存方法,包括慢速冷冻法、快速冷冻法、一步冷冻法、直接移植冷冻法和玻璃化冷冻法等。其中玻璃化冷冻法的步骤如下:
①将胚胎在室温下放人25%玻璃化溶液(VS液)中预处理15min;
②将预处理后的胚胎放在高浓度(75%一90%)的VS液中保存20—40min;
③将经过两步抗冻剂处理的胚胎直接投入液氮中保存。
此外还可以用液氮罐保存菌种、疫苗、骨组织、精子等物质,均可达到很好的长期存储的效果,使用液氮罐来保存这些样本细胞胚胎,需要操作仔细认真,而且需要选液氮保存时间比较长的液氮罐,能够长期保存细胞胚胎,不致于液氮挥发后细胞再转存其他液氮罐,而且为液氮罐补充液氮也需要注意对细胞样本胚胎等样本的保护。