大口径液氮容器储存胚胎的方式

　　大口径液氮容器是用于储存生物样本，特别是胚胎的理想选择。这种容器能够维持极低温度，通常在-196°C左右，从而确保细胞的活性和完整性。对于生物医学研究、动物繁育以及医学治疗中的胚胎冷冻保存，大口径液氮容器提供了必要的技术支持。

　　液氮容器的类型与选择

　　在选择液氮容器时，主要考虑以下几个因素：容器容量、材料、冷却效率和内部结构。通常，东亚牌大口径液氮容器的容量从10升到50升不等,口径上从80到200mm均可选。选择合适的容量取决于待储存胚胎的数量和大小。以一个常见的20升液氮容器为例，其可储存约200个胚胎。

　　容器的材料一般为铝或不锈钢，这些材料不仅耐低温，还具备良好的机械强度。液氮容器内壁应经过特殊处理，以减少液氮的蒸发损失。常见的蒸发率在0.1升/天到0.5升/天之间，具体数值会因使用频率和环境温度而异。

　　储存步骤

　　1. 预处理胚胎：在将胚胎放入液氮容器前，需对其进行冷冻保护剂的处理。常用的冷冻保护剂包括甘油(Glycerol)和二甲基亚砜(DMSO)。以甘油为例，浓度通常为10%-20%，这可以有效防止细胞在冷冻过程中形成冰晶，从而保护细胞结构。

　　2. 冷冻过程：将胚胎置于冷冻管中，好使用具有良好密封性的冷冻管，以防止冷冻保护剂的挥发。将冷冻管放入控制温度的冷冻仪中，逐渐降低温度，通常建议以每分钟1°C的速度降温至-80°C。此时，细胞内外的水分开始形成冰晶，细胞也逐渐进入休眠状态。

　　3. 转移至液氮容器：当胚胎冷冻到-80°C后，可以转移到液氮容器中。在转移时，应确保液氮容器内的温度保持在-196°C。使用液氮时，要遵循安全规范，佩戴防护手套和护目镜。同时，避免直接接触液氮，以免造成冻伤。

　　4. 储存监测：液氮容器应定期检查液氮的液位。液氮的补充应根据蒸发率进行，确保容器内始终保持足够的液氮。如果液氮水平低于推荐值，可能会导致样本温度上升，从而影响胚胎的存活率。

　　5. 解冻过程：为了复苏冷冻胚胎，解冻过程同样重要。将冷冻的胚胎从液氮容器中取出，迅速放入37°C的水浴中，时间控制在1-2分钟，让胚胎在短时间内恢复到正常温度。随后，将其转移到含有培养基的培养皿中，观察其活力和形态变化。

　　液氮容器的维护

　　液氮容器的维护至关重要。定期清洁容器内外表面，保持无尘和干燥，以避免污染。在使用过程中，应确保容器盖子紧闭，避免外部空气进入，从而减小液氮的蒸发损失。

　　液氮容器的选购

　　在选购液氮容器时，推荐选择知名品牌的产品，如Thermo、MVE、金凤、东亚牌等。这些品牌的容器一般具有较高的安全性和耐用性。此外，选购时还需注意售后服务和保修政策，以确保长期使用中的问题能够及时解决。

　　临床应用

　　在不孕不育治疗中，胚胎冷冻保存技术被广泛应用。通过液氮容器保存的胚胎可以在经过一段时间后再次进行植入，提高了妊娠的成功率。根据不同研究，冷冻胚胎的妊娠率与新鲜胚胎相当，甚至在某些情况下更高。