五、动物模型的建立：
l、术前手术室常规消毒。将冷冻异种骨膜置于无菌生理盐水中浸泡30分钟备X 16mm大小，两侧卷曲，套于试验组桡骨缺损两断端处，远、近端各套入3-4mm。将膜用可吸收线缝合成管状并与两端骨膜或软组织缝合固定，形成密闭的空腔，依次对应缝合皮肤切口。对照侧不包绕移植膜，彻底止血后，对应缝合皮肤切口。
3、术后双侧前肢不予外固定，因完整尺骨可以起到固定作用。分笼饲养，自由活动，标准动物饲料喂养，洁净饮水。室温保持于15．20"C，每同紫外线消毒。术后抗生素处理，每只肌注庆大霉素4万单位，每天1次，连续5天。

六、分组
按自身同期对照研究的设计原则，每只新西兰大白兔双前肢随机分为实验侧和对照侧，均造成双侧桡骨干中段10mm的骨缺损，连同骨断端两侧3--5mm的骨膜一并切除。实验侧骨缺损处包绕经处理的冷冻异种骨膜，对照侧骨缺损处（己破坏骨膜）不包绕冷冻异种骨膜，作为空白对照。

七、评价指标及取材情况
 

（一）X线观察：
术后第2、4、6、8周随机取10只新西兰大白兔为X线观察组，行双侧尺桡骨干摄片，术后第12周剩余的10只大白兔全部行摄片，观察骨痂生长情况，骨膜反应及骨塑形情况，统计愈合率。
 

（二）取材情况：
术后2、4、6、8、12周随机分批处死动物，每批5只，最后10只行愈合率评估，将双侧桡骨取下，取材部位为膜中央部、交接部、周围软组织部，行大体标本观察及组织学检查，30只新西兰兔全部进入结果分析。
 

（三）大体标本观察：
在手术解剖处死的新西兰大白兔时肉眼仔细观察组织结构变化，包括缺损内骨痂分布情况，塑形特点，膜的位置、形状等特点。
 

（四）组织学观察：
将取材组织冲净血液，Formical．4脱钙液脱钙5．7天，脱钙满意后，用10％福尔马林液固定，乙醇梯度脱水，二甲苯透明，浸蜡，纵向石蜡包埋5um厚，沿纵轴连续切片，HE染色。光镜和电镜下观察膜中央部、交接部、周围软组织部的组织学变化，以及皮质骨的重建变化。
 

（五）骨生物力学测定：
将兔桡骨置于三点弯曲央具，两下支点距离为30mm，上头以55mm&min．的速率加载，形变TSC、3光栅线位移传感器测量的精度为0．02mm。计算机自动采集和处理载荷％桡度曲线，采集频率30Hz，测力精度为3。
 

（六）术后12周兔桡骨骨缺损愈合率评估。

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