液氮罐内样品莫名污染？4个关键排查点与清洁方案
实验室或医疗机构在使用液氮罐存储细胞、试剂等样品时，偶尔会遇到“样品解冻后发现污染”的问题——细胞出现异常增殖、试剂浑浊，排查后发现其他环节无问题，终锁定是液氮罐内污染导致。这种情况不仅浪费样品，还可能影响实验或诊疗结果，其实只要找准污染源头，做好清洁维护，就能有效避免。
若液氮罐长期未清洁，罐内会残留样品碎屑、冻存管破裂后的试剂残留，这些杂质在液氮汽化过程中会附着在罐壁或样品表面，随着时间推移滋生细菌、霉菌；另外，若之前存储过污染样品，未彻底清洁就继续使用，也会导致交叉污染。
清洁步骤：
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先将罐内剩余液氮排空（注意在通风良好的室外操作，避免液氮汽化导致缺氧），待罐体恢复至常温（通常需要
24-48 小时，不要用加热设备加速升温，避免损坏内胆）；
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用干净的软布蘸取
75% 医用酒精，擦拭罐内壁、罐口、密封盖内侧（重点清洁角落和接缝处，这些地方容易残留杂质）；
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若罐内有顽固污渍（如干涸的试剂残留），可用软毛刷（刷毛要软，避免划伤内胆）蘸取酒精轻轻刷洗，刷洗后用干布擦干；
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清洁完成后，将罐体敞口放置在通风处，让酒精完全挥发（约
2-3 小时），再检查罐内是否有残留水分或污渍，确认干净后才能重新充装液氮。
清洁周期：普通存储场景（存储常规样品）每
3 个月清洁 1 次；若存储易污染样品（如生物活性样品），每月清洁 1 次；若发现有冻存管破裂，立即排空液氮并清洁罐体。
取样用的镊子、冻存管架、手套等工具若未彻底消毒，会携带细菌、病毒或杂质，每次伸入罐内取放样品时，这些污染物会落在罐内或样品表面，导致污染。比如用未消毒的镊子夹取细胞冻存管，镊子上的细菌会随冻存管进入液氮，解冻后细菌复苏，导致细胞污染。
消毒规范：
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金属工具（镊子、冻存管架）：每次使用前用高压蒸汽灭菌（121℃、103kPa，灭菌
20 分钟），或用医用酒精浸泡 30 分钟后晾干（注意酒精浓度不可过高，75% 酒精消毒效果）；
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手套：使用一次性无菌手套，每次操作前更换，若手套接触过外部环境，立即更换新手套；
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样品容器（冻存管、试剂瓶）：存储前检查是否有破损、漏液，确保密封完好，且容器外壁需用酒精擦拭消毒，避免外壁携带污染物。
液氮罐的密封盖若出现密封圈老化、盖体变形，会导致密封不严，外界的灰尘、细菌、湿气会通过缝隙渗入罐内，污染液氮和样品；尤其是在潮湿环境下，渗入的湿气会在罐内结冰，解冻后会滋生细菌。
排查与修复：
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每周检查密封盖：观察密封圈是否有裂纹、变硬、变形，若有则立即更换同型号耐低温密封圈（建议选用硅橡胶材质，耐低温
- 60℃以下，且不易老化）；
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检查盖体是否变形：将密封盖扣在罐口，观察是否有缝隙，若盖体变形，可联系厂家更换盖体，或在盖体与罐口接触处加一层耐低温密封垫（厚度
1-2mm），增强密封性；
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每次关闭密封盖时，确保盖体扣紧，避免未扣严导致密封失效。
若充装的液氮纯度不足，含有灰尘、水分或其他杂质，这些杂质会随着液氮进入罐内，附着在样品表面，导致污染。比如使用工业级液氮（纯度
99.9% 以下）存储生物样品，其中的杂质会影响样品活性，甚至导致污染。
选型与充装建议：
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根据存储样品选择液氮纯度：存储生物细胞、试剂等敏感样品，需选用医用级或实验室级液氮（纯度≥99.999%）；存储普通金属样品，可选用工业级液氮，但也要确保纯度≥99.9%；
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选择正规供应商：充装前确认供应商资质，要求提供液氮纯度检测报告，避免购买劣质液氮；
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充装时注意卫生：充装用的软管每次使用前用酒精消毒，避免软管内残留杂质污染液氮；充装过程中不要让软管触碰地面或其他污染物。
清洁维护后，建议定期抽检罐内样品（如每 1 个月取 1-2
个备用样品解冻检测），观察样品是否有污染迹象；同时记录每次清洁时间、液氮充装情况、样品存储种类，通过数据对比及时发现污染隐患，确保样品存储安全。
