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液氮罐中的液氮是否会对样品造成污染?

 

发现新买回来的液氮罐里好多灰,没办法用纯化水冲洗了几遍。灰都这么多了,估计什么无菌,内毒素之类的就更没保障了。
想问一下,
问:大家是直接清洗晾干直接装液氮就使了吗,还是有什么灭菌方法吗?感觉不大好实施。

答:液氮罐应该不用灭菌吧,简单清洁就可以了。细菌在液氮里和细胞一样是休眠,不会死。另外我们复苏的环境也不是无菌的,所以不用纠结那些在液氮里不繁殖的少量细菌了。

 


问:因为在检测细胞库的各项指标是合格的,所以如果按实施的话来看,液氮条件下细菌是不能生存吗(细菌直接暴露于液氮)?液氮环境下其他不利条件也能给消除?

答:如果你实在担心,国外很多采用气态保存,风险较低,因为没有冻存管与液氮的直接接触。细胞液氮存放在一般区域,细胞管从液氮取出后,放入干冰转移盒中,整体传递到C级区域,在超净台或者安全柜旁边进行水浴复苏细胞;也有战友说,直接在细胞液氮存放区域水浴复苏,后经过传递窗直接转移到C级接种区域;还有一种干法,不是太好,是直接将细胞管从液氮取出后,不复苏也不冷冻保护,通过传递窗或者物流通道传递进去,到C级进行复苏。传递窗可能还快一点,物流通道那岂不是要跑着来干,拿着个未复苏的细胞也不安全吧。

 

 

问:目前好像对液氮的质量没有什么特殊的要求,是因为液氮是极端环境,一些方法不好实施吗?

答:如果你是采用液氮保存,采用冻存管如果不是玻璃拉丝的形式而是塑料管,一定会存在盖子处封闭不好液氮渗入的情况,此时需要考虑液氮的质量问题,国外就有专门案例,HBV病毒在液氮中钻入到冻存管中,这就是液氮中一些外源因子起码是有隐患的,关于液氮罐如何消毒或清洁可以询问厂家如何进行,但相比下来,液氮质量如何控制,进行哪些指控更为重要。战友可以展开讨论。

 

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